Морфологические изменения в печени крыс при различных стадиях внутрибрюшинного развития экспериментальной перевивной опухоли саркома 45 и в различные периоды после лечения циклофосфаном

Проблема взаимоотношений опухоли и организма в последнее время привлекает всё большее внимание исследователей. Опухоль с самого начала своего развития связана с организмом, существует как часть его. Поэтому постановка вопроса о взаимоотношениях опухоли и организма предполагает не противопоставление новообразования организму, а изучение их взаимодействия, осуществляющегося путём двусторонних связей. Изучение состояния печени опухоленосителей является частью этой общей проблемы.Настоящая работа ставила своей задачей изучение морфологических изменений печени лабораторных крыс опухоленосителей при внутрибрюшинном введении циклофосфана.

Введение. Проблема взаимоотношений опухоли и организма в последнее время привлекает всё большее внимание исследователей. Наиболее чётко сущность этой проблемы выразил один из её основоположников Р.Е. Кавецкий [9], который считает, что без раскрытия сложных путей взаимодействия между канцерогенными факторами и организмом, а затем между организмом и опухолевыми клетками, нельзя правильно понять причины и условия возникновения опухолей, сущность и механизмы их развития, разработать эффективные методы борьбы со злокачественными заболеваниями. Опухоль с самого начала своего развития связана с организмом, существует как часть его. Поэтому постановка вопроса о взаимоотношениях опухоли и организма предполагает не противопоставление новообразования организму, а изучение их взаимодействия, осуществляющегося путём двусторонних связей.

Изучение состояния печени опухоленосителей является частью этой общей проблемы. Помимо выполнения ряда жизненноважных функций, печени принадлежит важная роль в поддержании нормального стероидного гомеостаза, нарушение которого может привести к малигнизации гормонально зависимых органов, либо усугубить течение злокачественного процесса в организме. Отсюда вытекает важность изучения состояния печени при развитии в организме злокачественной опухоли, что может иметь не только теоретическое, но и практическое значение для разработки рациональных рекомендаций для противоопухолевой терапии.

Данные, имеющиеся в доступной литературе касаются главным образом изменений в печени, при спонтанных опухолях различной локализации [2, 3, 4, 5, 6, 8, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 18, 19, 22, 24]. Морфологические же изменения в печени, связанные с развитием экспериментальных опухолей носят фрагментарный характер [1, 20, 21, 23]. Экспериментальное и клиническое изучение противоопухолевых препаратов показало, что получение отчётливого противоопухолевого эффекта при обычных методиках применения, рассчитанных на общее резорптивное действие этих веществ, закономерно сочетается с нежелательными осложнениями со стороны нормальных тканей и органов [7, 9, 17]. Настоящая работа ставила своей задачей изучение морфологических изменений печени лабораторных крыс опухоленосителей при внутрибрюшинном введении циклофосфана.

Материал и методы исследовавния. Материалом для данного исследования послужила печень беспородных лабораторных самцов крыс репродуктивного возраста. Животные распределялись по пяти группам (по 5 штук в каждой). Группа №1 (контрольная) включала интактных животных. Группы №2, №3, №4 и №5 (опытные) включали крыс, которым внутрибрюшинно перевивался штамм клеток экспериментальной, опухоли саркома 45. Начиная с седьмого дня после перевивки животным опытных групп №4 и №5 производилось внутрибрюшинное введение циклофосфана в дозе 15 мг/кг. Препарат вводился один раз в сутки шестикратно.

Животные групп №1 и №2 и №4 усыплялись с помощью медицинского эфира на двадцатый день после начала эксперимента, животные группы №3 усыплялись аналогичным образом на сороковой день, животные группы №5 - на тридцатый день. После убоя животных и вскрытия брюшной полости печень извлекалась и фиксировалась в 10%-ном растворе нейтрального формалина. Парафиновые срезы каудальных участков органа окрашивались гематоксилин-эозином. Гистологические препараты изучались под оптическим микроскопом.

Обсуждение. Микроскопически печень интактных крыс характеризуется дольчатой структурой. Гепатоциты долек в подавляющем большинстве случаев имеют многогранную форму. Границы клеток выявляются с трудом, а цитоплазма содержит крупную зернистость. Диаметр гепатоцитов составляет 13,53±0,35 мкм. Печеночные клетки располагаются неправильными рядами, которые ветвятся, направляясь от периферии дольки в сторону центральной вены. Ядра гепатоцитов округлые. Они имеют хорошо выраженную кариолемму и содержат отчётливо видимые ядрышки и глыбки хроматина. Диаметр ядер - 7,37±0,29 мкм. Среди печёночных клеток встречаются двуядерные, диаметр которых достигает 23,4 мкм и трёхядерные, диаметром до 25,74 мкм.

Между рядами гепатоцитов располагаются синусоиды, в которых в значительных количествах обнаруживаются форменные элементы крови. Изнутри синусоиды выстланы эндотелием с овально-вытянутыми гиперхромными ядрами. Средний диаметр синусоидов составляет 7,41±0,39 мкм. Синусоиды впадают в центральные вены, внутренняя поверхность которых выстлана эндотелием с овальновытянутыми и палочковидными ядрами, густо окрашенными гематоксилином.

Соединительнотканные прослойки выражены очень слабо, ввиду чего границы между дольками неразличимы. Имеющиеся малочисленные пучки соединительной ткани образованы тонкими волокнами и клеточными элементами, они окружают междольковые кровеносные сосуды и желчные протоки.

Междольковые вены относительно крупные. Они имеют широкий просвет и тонкую стенку, выстланную изнутри плоским эндотелием с густоокрашенными палочковидными ядрами.

Междольковые артерии по диаметру значительно уступают венам. Они имеют узкий просвет и более толстую (по отношению к диаметру их просвета) стенку, наибольший удельный вес в которой приходится на медию.

Междольковые желчные протоки выстланы кубическим и низкопризматическим эпителием со слабо выраженной базальной мембраной. Границы эпителиоцитов довольно хорошо различимы. Округлые и овальные ядра клеток слабо окрашены гематоксилином, но имеют хорошо очерченную оболочку.

В печени крыс опытной группы №2 (с двадцатидневной перевитой внутрибрюшинно опухолью саркома 45) дольковое строение сохранено, однако имеют место довольно обширные деструктивные изменения. Данные изменения затрагивают в большей степени центральные участки печёночных долек, которые окружают суженные центральные вены, в просветах которых содержатся фрагменты разрушающихся клеток печени.

В ткани печени имеются хорошо сохранившиеся гепатоциты, границы которых просматриваются с трудом. Их цитоплазма зернистая, ядра округлые с отчётливой кариолеммой и хорошо различимыми ядрышками. Средний диаметр гепатоцитов составляет 16,9±0,51 мкм, а диаметр их ядер - 8,74±0,3 мкм. Изредка встречаются двуядерные клетки.

Во многих участках печени обнаруживаются мелкие очаговые некрозы, сопровождающиеся дискомплексацией печёночных балок. Многочисленные случаи гибели клеток печени сопровождаются их сильной вакуолизацией, что обусловливает образование мелких овальных полостей, содержащих сморщенное ядро и обрывки цитоплазмы. На месте отдельных полностью разрушенных печёночных клеток остаются мелкие полости без содержимого.

Обнаруживаются также полости значительно более крупного размера, содержащие разрушающиеся ядра гепатоцитов и обрывки цитоплазмы. Встречаются отдельные безъядерные клетки, а также целые участки бесструктурной эозинофильной массы с осколками ядерного материала.

Печень крыс опытной группы №3 (с сорокадневной опухолью) характеризуется выраженным нарушением дольчатого строения. Центральные вены сильно расширены. Внутридольковые синусоиды кровенаполнены. Значительное количество гепатоцитов имеет структуру без видимых изменений: их цитоплазма зернистая, границы просматриваются с трудом, ядра с хорошо очерченной кариолеммой и отчётливо видимыми ядрышками и глыбками хроматина. Диаметр клеток составляет 17,74±0,53 мкм, а диаметр их ядер - 8,0±0,25 мкм. Среди таких печёночных клеток встречаются двуядерные.

Многие гепатоциты обнаруживают выраженные признаки деструкции. Так нередко встречаются скопления безъядерных клеток. Большое количество гепатоцитов вакуолизировано, а их ядра оттеснены на периферию. На месте полностью разрушенных печёночных клеток видны мелкие кистоподобные полости без содержимого.

В целом в печени возрастает удельный вес обильно васкуляризированных соединительнотканных прослоек.

В печени крыс опытной группы №4 в целом сохранена дольчатая структура. Однако имеют место многочисленные зоны дегенерации, расположенные как в центральных, так и в периферических участках долек. При этом во многих случаях центральные вены долек печени сильно расширены.

В тех участках долек, в которых сохранено балочное строение, многогранные гепатоциты содержат зернистую цитоплазму, а также округлые и овальные ядра с хорошо очерченной кариолеммой, отчётливо видимыми ядрышками и хроматиновым рисунком. Среди гепатоцитов обнаруживаются двуядерные.

В центре долек ширина печёночных балок составляет 10,61±0,28мкм, а диаметр ядер гепатоцитов - 5,77±0,24 мкм. В периферических участках данные показатели равны соответственно 9,1±0,3 мкм и 7,02±0,22 мкм.

Имеются также участки, характеризующиеся дискомплексацией печёночных балок. Разрушающиеся гепатоциты, содержащие гиперхромные ядра неправильной формы (диаметром 4,95±0,2 мкм), расположены вперемежку с многочисленными полостями, оставшимися на месте полностью разрушенных клеток печени.

Также встречаются участки бесструктурной эозинофильной массы, содержащей как сохранившиеся, так и сморщенные ядра. Помимо этого обнаруживаются небольшие зоны комковатой эозинофильной массы, которые полностью лишены ядер.

В печени крыс группы №5 имеет место сильное расширение центральных вен, которые во многих случаях окружены широкими соединительнотканными прослойками. Небольшие участки сохранившейся ткани печени состоят из многоугольных гепатоцитов, границы которых просматриваются с трудом. Цитоплазма клеток зернистая. Округлые и овальные ядра (диаметром 9,2±0,28 мкм) имеют хорошо очерченную кариолемму и отчётливо видимые ядрышки и хроматиновый рисунок. Синусоидные капилляры между гепатоцитами расширены и содержат форменные элементы крови. В участках сохранившейся ткани печени нередко можно встретить безъядерные гепатоциты, а также гепатоциты, содержащие ядра с размытыми границами.

Большой удельный вес приходится на деструктивно изменённую ткань печени. Имеют место довольно обширные участки, состоящие из клеток с пикнотичными гиперхромными ядрами. Другие участки представляют их себя бесструктурную сетчатую массу с беспорядочно разбросанными в ней пикнотичными ядрами и форменными элементами крови. Встречаются целые участки, состоящие из безъядерных клеток. Довольно часто в ткани печени обнаруживаются пространства в виде трещин, которые содержат форменные элементы крови.

Выводы. Внутрибрюшинное развитие экспериментальной перевивной опухоли саркома 45, а также введение циклофосфана обусловливают выраженные деструктивные изменения в печени крыс.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Баличева Л.В. Структурно-метаболические и функциональные изменения в печени опухоленосителей. // Актуальные вопросы современной онкологии.- М.: 1973.- В. 3.- С. 91 - 111.
2. Брамберга В.М., Съяксте И.И. К морфологии печени при раке и предраковых заболеваниях желудка. // Клиника и лечение злокачественных новообразований (Труды Латвийского института экспериментальной и клинической медицины).- Рига: 1963. - Т. 9. - С. 207 - 214.
3. Вакуленко Н.Н. Кочетов В.В. Патологогистологические изменения печени при лимфогранулематозе. // Гигиена, физиология и эпидемиология на железнодорожном транспорте. - 1974. - № 48. - С. 24 - 27.
4. Герасимович Г.С. Ярошева А.А. Формы поражения печени при лимфогранулематозе. // Материалы второго республиканского съезда гематологов и трансфузиологов Белоруссии.- Минск: 1973.- С. 22 - 24.
5. Гурин И.Л. Гистопатологические изменения в сосудистой системе печени у больных злокачественными опухолями. // Тезисы докладов двадцать пятой научной сессии Куйбышевского медицинского института. - Куйбышев: 1966. - С. 89 - 91.
6. Гурин И.Л. Патоморфология сосудов печени у больных злокачественными опухолями. // Вопросы морфологии кровеносной и нервной систем (Научные труды Куйбышевского медицинского института.- Куйбышев: 1969.- Т. 54.- В. 2.- С. 200 - 206.
7. Должанов А.Я., Евтеева М.С. Состояние кишечного эпителия и подлежащей соединительной ткани при введении циклофосфана и гипербарической оксигенации.// Закономерности морфогенеза и регенерации в норме, патологии и индивидуальном развитии.- Свердловск: 1978.- С. 61-62.
8. Егорова Г.В., Ладыжин Э.П. Сравнительные данные функциональных и морфологических изменений печени у больных раком желудка. // Актуальные проблемы онкологии и медицинской радиологии (Тезисы докладов Научно-исследовательского института онкологии и медицинской радиологии).- Минск: 1967.- С. 159 - 160.
9. Задумина С.Ю., Шаманек Т.П. Морфологические аспекты влияния циклофосфана на органы иммунной системы больших песчанок.// Патологическая физиология особо опасных инфекций.- Саратов: 1981.- С. 40-44.
10. Зубаирова Н.И., Шестов А.Т. Морфологические изменения в печени при раке желудка и язвенной болезни. // Сборник научных трудов врачей Казахской железной дороги и кафедры факультетской хирургии АГМИ.- Алма-Ата: 1971.- Т. 5.- С. 21 - 24.
11. Кавецкий Р.Е. Опухоль и организм.- Киев: 1962.- 301 с.
12. Каграманов С.В., Футорян Е.С., Шубин Б.М., Гулькевич К.Ю., Озерский А.Н. Морфологические изменения в печени при механической желтухе, вызванной раком. // Материалы второй научно-практической конференции по онкологии.- М.: 1967.- С. 62 - 63.
13. Королёв Б.А., Гагушин В.А. Авров Ю.М., Хавина Е.М. Опыт оперативного лечения механической желтухи // Хирургия. - 1970. - № 11. - С. 3 - 6.
14. Краковский А.И., Подолужный В.И., Шорин Ю.П. Функциональное состояние митохондрий печёночных клеток при механической желтухе // Вестник хирургии. - 1974. - № 4. - С. 13 - 15.
15. Лылова С.Н., Палатова Л.Ф. Гистохимические изменения в печени при опухолевой обструкции желчных путей. // Труды Пермского медицинского института.- Пермь: 1974.- Т. 128.- С. 128 - 131.
16. Магдиев Т.Щ. О патологии печени при механической желтухе // Вестник хирургии.- 1973.- № 11.- С. 45 - 47.
17. Медведева М.П., Бекиш О.-Я.Л. Влияние циклофосфана на морфологию брыжеечных узлов при экспериментальном трихинеллёзе.// Материалы докладов к III-ей Всесоюзной конференции по проблеме трихинеллёза человека и животных.- Вильнюс: 1981.- С. 114-117.
18. Митерев Ю.Г. О поражении печени при гемобластозах. // Советская медицина.- 1979.- № 9.- С. 62 - 67.
19. Михайличенко В.А., Масс Я.Б., Педенко Э.П. Профилактика печёночно-почечной недостаточности, возникающей у больных раком органов панкреатодуоденальной области после операций // Вопросы онкологии.- 1974.- № 1.- С. 29 - 33.
20. Мурников В.Т. Влияние переменного магнитного поля на гистофункциональное состояние печени интактных животных и животных-опухоленосителей.- Автореферат диссертации на соискание ученой степни кандидата медицинских наук.- М.: 1975.28 с.
21. Сизиков А.И. Гистологические изменения в печени у крыс-опухоленосителей с саркомой М-1. // Вопросы клинической и экспериментальной онкологии (Киргизский научно-исследовательский институт онкологии). - 1968.- Т. 4.- С. 181 - 190.
22. Сизиков А.И. Лепп Э.К. К вопросу о морфологических изменениях в печени у больных, оперированных по поводу рака желудка. // Тезисы третьей республиканской научной каонференции онкологов Киргизии.- Фрунзе: 1972.- С. 91 - 93.
23. Сизиков А.И. Об изменении плоидности ядер гепатоцитов у животных с перевивными опухолями при регенерации печени и рентгеновском облучении. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины.- 1981.- Т. 92.- № 10.- С. 473 - 476.
24. Чурсина М.А., Сысоева Т.В. Изменеия печени при новообразованиях различной локализации. // Здравоохранение Туркменистана.- 1971.- №1.- С. 6 - 8.